مكان المنشأ: | الصين |
اسم العلامة التجارية: | Foreasy |
إصدار الشهادات: | ISO |
رقم الموديل: | IM-02011 |
الحد الأدنى لكمية: | 200 كيلو |
---|---|
الأسعار: | 900 usd/200 KU |
تفاصيل التغليف: | كيس ورق كرافت |
وقت التسليم: | 5-8 أيام عمل |
شروط الدفع: | L / C ، D / A ، D / P ، T / T |
القدرة على العرض: | 1000000 كو شهريا |
ماركة: | سهل | تحديد: | 1 مل × 5200 كو |
---|---|---|---|
يكتب: | النسخ العكسي MMLV | عينات قابلة للتطبيق: | M-MLV للحصول على النسخ العكسي |
اسم المنتج: | إنزيم النسخ العكسي M-MLV | موك: | 200 كيلو |
تسليط الضوء: | MMLV Reverse Transcriptase,1ml MMLV Reverse Transcriptase,MMLV Reverse Transcriptase RT Enzyme |
Foreasy M-MLV Reverse Transcriptase هو نسخة عكسية جديدة يتم التعبير عنها في بكتيريا E. coli باستخدام تقنية إعادة التركيب الجيني.وهو عبارة عن بوليميراز DNA مؤتلف يقوم بتركيب خيط DNA مكمل من الحمض النووي الريبي أحادي السلسلة أو الحمض النووي أو الحمض النووي الريبي: هجين الحمض النووي.لا يحتوي على نشاط RNase H ، واستقرار قوي ، وتقارب RNA قوي ، وحساسية عالية للكشف.
مكون | IM-02011 | IM-02012 | IM-02013 |
Foreasy Reverse Transcriptase (200 وحدة / ميكرولتر) |
200 كيلو (1 مل) | 2000 كو (10 مل) | 5000 كو (25 مل) |
5 × فوريسي RT العازلة |
1 مل × 5 | 10 مل × 5 | 10 مل × 12 |
رقم القط | يكتب | |
IM-02011 | 200 كيلو | 200 وحدة / ميكرولتر |
IM-02012 | 2،000 كيلو | 200 وحدة / ميكرولتر |
IM-02013 | 5000 كيلو | 200 وحدة / ميكرولتر |
قم بالتخزين عند -20 ± 5 ℃ لمدة عامين أو عند -80 ℃ للتخزين طويل الأجل.
u توليف أول خيط من cDNA لـ RT-PCR و RT-PCR في الوقت الحقيقي
ش التوليف (كدنا) للاستنساخ والتعبير.
u جيل من تحقيقات (كدنا) المسمى للمصفوفات الدقيقة.
u تحليل التمهيدي RNA
وحدة واحدة من M-MLV RT هي كمية الإنزيم المطلوبة لدمج 1 نانومول من [3H] dTTP في 10 دقائق عند 37 درجة مئوية باستخدام poly (A) oligo (dT) 25 كقالب تمهيدي.
50 ملي تريس- حمض الهيدروكلوريك (الرقم الهيدروجيني 8.3) ، 40 ملي كلوريد الهيدروجين ، 6 ملي MgCl2 ، 1 ملي مولار DTT ، 0.5 ملي مولار [3 ساعات] dTTP ، 0.1 ملي مول (A) ، 0.1 ملي مولار أوليجو (دي تي) 25 ، 0.1 مجم / مل BSA ، وإنزيم في 50 ميكرولتر لمدة 10 دقائق عند 37 درجة مئوية.
تجميع أول حبلا (كدنا) (20 ميكرولتر نظام رد الفعل)
1. هيكل نظام RT (يجب تنفيذ الخطوات التالية على الجليد).
1.1 بعد إزالة الجليد من كل مكون ، أضفه إلى أنبوب التفاعل بالترتيب التالي للجدول 1
الجدول 1:
نظام RT إضافة المحتوى
|
مقدار |
التركيز النهائي
|
قالب RNA | X µL | مجموع الحمض النووي الريبي: <5 ميكروغرام / مرنا: <0.5 ميكروغرام |
عشوائي التمهيدي | 0.5 ميكروغرام | 100 ميكرومتر |
أو Oligo (dT) 18 Primer | 0.2 ميكروغرام | 100 ميكرومتر |
أو محدد التمهيدي | 15-20 pmol | 15-20 pmol |
RNase خالية من ddH2O | إلى 12.5 ميكرولتر |
1.2 بعد تحضير النظام ، اخلط بلطف وجهاز الطرد المركزي لفترة وجيزة ، ثم قم بإجراء تفاعل RT وفقًا لما يلي في الجدول 2
الجدول 2
خطوة | درجة الحرارة | زمن | محتوى |
1 | 65 | 5 دقائق | تمسخ |
تبرد بسرعة على الجليد بعد الانتهاء من التفاعل | |||
الجدول 3:
نظام RT إضافة المحتوى
|
مقدار |
التركيز النهائي
|
5 × فورسي RT العازلة | 4 ميكرولتر | 1 × |
مثبط Foreasy RNase (40 وحدة / ميكرولتر) | 0.5 ميكرولتر | 1 يو / ميكرولتر |
مزيج dNTP (10 ملم لكل منهما) | 2 ميكرولتر | 1 ملم |
النسخ العكسي الفوري (200 وحدة / ميكرولتر) | 1 ميكرولتر | 10 يو / ميكرولتر |
1.4 بعد تحضير النظام ، اخلط بلطف وجهاز الطرد المركزي لفترة وجيزة ، ثم نفذ ظروف تفاعل RT في الجدول 4 التالي
الجدول 4:
خطوة | درجة الحرارة | زمن | محتوى |
1 | 42 ℃ | 50 دقيقة | تخليق (كدنا) |
2 | 70 | 10 دقائق | النسخ العكسي المعطل |
3 | 4 ℃ | غير متاح | ضعه عند 4 درجات مئوية لاستخدامه لاحقًا أو تخزينه عند -20 درجة مئوية بعد التفاعل |
ملاحظة: عند استخدام Random Primer ، يجب تسخين التفاعل مسبقًا عند 25 درجة مئوية لمدة 10 دقائق قبل تفاعل الخطوة الأولى.
الإجراء أعلاه هو للإشارة فقط ، وتختلف ظروف التفاعل الفعلية اعتمادًا على بنية القالب ، والبادئات ، وما إلى ذلك.
بعد اكتمال التفاعل ، يتم وضع منتج التفاعل على الجليد لإجراء تجارب لاحقة مباشرةً ؛للتخزين طويل الأمد ، يرجى تخزينه في درجة حرارة -20 درجة مئوية أو -80 درجة مئوية.
اتصل شخص: David
الهاتف :: +8616602829025