مجموعة PCR المباشرة للبذور النباتية I-UNG للبذور النباتية التي تحتوي على مكونات منخفضة السكاريد والبوليفينول

وصف:

مجموعة PCR المباشرة للبذور النباتية I-UNGيستخدم نظامًا فريدًا للتفاعل التحلل ، والذي يمكنه إطلاق الحمض النووي الجيني سريعًا من عينات البذور النباتية ذات المحتوى المنخفض من السكاريد والبوليفينول (مثل: الأرز والقمح والتبغ والذرة وفول الصويا ، وما إلى ذلك) لاستخدامه في تفاعلات تفاعل البوليميراز المتسلسل ، لذلك فهو على وجه الخصوص مناسب للاختبارات الجينية واسعة النطاق.من أجل تلبية احتياجات اختبارات الكشف المختلفة ، يمكن لهذه المجموعة أن تستخدم أنواعًا متعددة من العينات (مثل البذور الكاملة ، أو قطع الأنسجة الصغيرة ، أو العينات المطحونة لبذور متعددة) لإجراء التجارب.من بينها ، بالنسبة لعينات البذور التي لا تزال بحاجة إلى الإنبات ، يمكنك اختيار قطع قطع الأنسجة الدقيقة (1-5 مجم) بخلاف جنين البذور للتجربة ؛بالنسبة للتجارب التي يجب أخذ عينات منها في عدد كبير من العينات ، يمكنك اختيار مزج عدة عينات ودمجها.بعد الطحن في جزيئات يبلغ قطرها حوالي 0.5 مم ، يمكن إجراء التجربة (يمكن اكتشاف 0.1 ٪ على الأقل من العينة المستهدفة).

يمكن إكمال عملية إطلاق الحمض النووي الجيني من نظام تفاعل الانقسام في غضون 5-10 دقائق.ليست هناك حاجة لعمليات أخرى لإزالة البروتين أو الحمض النووي الريبي أو المستقلبات الثانوية ، ويمكن استخدام الكميات النزرة الصادرة من الحمض النووي كقالب لتفاعلات تفاعل البوليميراز المتسلسل.

2 × البذور PCR سهل^TMيتمتع المزيج بتسامح قوي مع مثبطات تفاعل PCR ، ويمكنه استخدام خليط تحلل المواد النباتية بشكل مباشر كقالب للتضخيم الفعال والمحدّد.يحتوي هذا الكاشف على D-Taq DNA Polymerase و dNTPs و MgCl2 ومخزن التفاعل ومحسن تفاعل PCR ومحسن ومثبت خصيصًا لـ PCR المباشر.يمكن استخدامه جنبًا إلى جنب مع نظام تفاعل التحلل للكشف عن العينات بسرعة وسهولة ، وله خصائص حساسية عالية وخصوصية قوية واستقرار جيد.

2 × البذور PCR سهل^TMيستخدم Mix (UNG) dUTP بدلاً من dTTP على أساس 2 × Seed PCR EasyTM Mix ، ويضيف إنزيم UNG (Uracil-N-glycosylase) الذي يمكن أن يؤدي إلى تدهور القالب الذي يحتوي على dUTP في نفس الوقت.قبل تفاعل تفاعل البوليميراز المتسلسل ، يُستخدم إنزيم UNG لتحطيم منتج تفاعل البوليميراز المتسلسل الذي يحتوي على اليوراسيل.لن يكون لإنزيم UNG أي تأثير على القالب الذي لا يحتوي على اليوراسيل ، مما يضمن خصوصية ودقة التضخيم ويمنع إمكانية إجراء اختبارات جينية على نطاق واسع.حدث تلوث لمنتجات PCR

D-Taq DNA polymerase عبارة عن بوليميريز DNA تم تطويره خصيصًا بواسطة Foregene لتفاعلات PCR المباشرة.يتمتع بوليميراز D-Taq DNA بقدرة تحمل قوية لمجموعة متنوعة من مثبطات تفاعل PCR ، ويمكنه تضخيم كميات ضئيلة من الحمض النووي بكفاءة في أنظمة التفاعل المعقدة المختلفة ، ويمكن أن تصل سرعة التضخيم إلى 2Kb / min ، وهو مناسب بشكل خاص لتفاعل تفاعل PCR المباشر.

وفقًا للاختلافات في عينات النباتات ، يتم تقسيم المنتجات إلى فئتين: مجموعة PCR المباشرة لبذور النبات ومجموعة بذور النبات Direct PCR Plus Kit.في مرحلة التحلل ، مع الأخذ في الاعتبار أن الأنواع المختلفة من البذور أو مواد الأنسجة تختلف اختلافًا كبيرًا في كمية الكواشف المستخدمة في عملية التحلل ، يمكن للعملاء اختيار مجموعة PCR المباشرة (الصغيرة والمتوسطة) أو بذور النبات (كبيرة) وفقًا لـ حجم موادهم التجريبية مجموعة Direct PCR ؛في مرحلة اكتشاف PCR ، يمكن للعملاء أيضًا اختيار 2 × Seed PCR EasyTM Mix أو 2 × Seed PCR Easy^TMمزيج (UNG) الذي يمكن أن يمنع تلوث منتجات تضخيم PCR وفقًا للاحتياجات التجريبية.

تحديد:

50 × 20 ميكرولتر rxns ، 200 × 20 ميكرولتر rxns ، 500 × 20 ميكرولتر rxns ، 2000 × 20 مايكرولتر rxns

مكونات المجموعة:

الميزات والمزايا:

- لا حاجة إلى تنقية الحمض النووي باهظة الثمن وتستغرق وقتًا طويلاً.

- طلب العينة صغير ، فقط خذ بذرة واحدة.

- ليست هناك حاجة إلى معالجات خاصة مثل الطحن والسحق ، والعملية بسيطة.

- يمكّن نظام PCR المحسّن PCR من الحصول على خصوصية أعلى وتحمل أقوى لمثبطات تفاعل PCR.

- يمكن لنظام PCR المضاد للتلوث 2 × Seed PCR EasyTM Mix (UNG) أن يقضي بشكل فعال على التلوث الناجم عن منتجات PCR ويضمن خصوصية ودقة التضخيم.

معلمات المجموعة:

التطبيق: تحديد النباتات المعدلة وراثيا ، التنميط الجيني ، إلخ.

العينة: بذور أو أنسجة نباتية تحتوي على نسبة منخفضة من السكاريد والبوليفينول.

حجم العينة: بذرة كاملة واحدة ، أنسجة نباتية 1-100 مجم

نطاق الكشف: منتج PCR ≤1kb

طلب

- نطاق التطبيق: مجموعة متنوعة من البذور النباتية.

- الحمض النووي المنطلق من تحلل العينة: يستخدم فقط كقالب PCR.

- يمكن استخدام العدة للأغراض التالية: تحديد البذور المحورة وراثيا ، التنميط الجيني للنبات ، إلخ.

معلومات تكوين المجموعة

- Buffer SP1: يوفر البيئة اللازمة لتفاعل تحلل بذور النبات.

- المخزن المؤقت SP2: قم بإبطال مفعول المادة المحللة بحيث لا تؤثر على تفاعل تفاعل البوليميراز المتسلسل اللاحق.

-2 × البذور PCR سهل^TMMix (UNG): يحتوي على معدّل خاص من بوليميراز DNA Taq ، وإنزيم UNG ، و dNTPs ، و dUTP ، و MgCl2 ، ومخزن التفاعل ، ومُحسِّن تفاعل PCR ، ومحسن ومثبت ، وما إلى ذلك أثناء تفاعل PCR ، فقط أضف خليط التحلل المناسب ، والبادئات ، و ddH2O إلى 2 × Seed PCR EasyTM Mix (UNG) لاستخدامه في تفاعل تفاعل البوليميراز المتسلسل.

-6 × مخزن تحميل الحمض النووي: لا يحتوي المخزن المؤقت للتحميل على SDS.يوصى باستخدام المخزن المؤقت لتحميل الحمض النووي 6 × المتضمن مع المجموعة عند إجراء الرحلان الكهربي لهلام الاغاروز من أجل الحصول على نتائج تفريد جيدة.لا تستخدم مخزن التحميل الذي يحتوي على SDS ، وإلا سيكون هناك ذيل كبير من الضوء الساطع في الممر أثناء الرحلان الكهربائي ، مما سيؤثر على النتائج التجريبية.

تدفق العمل:

مخطط كهربية:

التخزين ومدة الصلاحية:

-يجب تخزين الجزء الأول من هذه المجموعة في درجة حرارة الغرفة أو 2-8 ℃.

يمكن تخزين vReagents Buffer SP1 ، Buffer SP2 ، 6 × DNA Loading Buffer ، في ظل ظروف جافة ، لمدة 12 شهرًا.إذا كنت بحاجة إلى تخزين المجموعة لفترة أطول ، فيمكنك تخزينها في 2-8 ℃.

- يجب تخزين الجزء الثاني من هذه المجموعة في درجة حرارة -20 درجة مئوية.

vReagent 2 × Seed PCR Easy Mix ، إذا تم استخدامه بشكل متكرر ، يمكن أيضًا تخزينه في 4 ℃ للتخزين قصير الأجل (يستخدم في غضون 10 أيام).

الملحق الأول

المقارنة بين Direct PCR و PCR التقليدي: